丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活基因6的反式激活基因的筛选

作者：王建军刘妍成军杨倩纪冬党晓燕王春花

来源：世界华人消化杂志, 2004, (01): 60-63.

• 反式激活
• 转染
• 基因差异表达
• 全长序列
• 编码基因
• 抑制性消减杂交
• 表达质粒
• 聚合酶链反应
• 插入片段
• 生物信息学分析

目的:筛选与克隆:NS5A反式激活的新型靶基因NS5ATP6 的反式激活基因,探讨其可能存在的调节功能. 方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学(bioin- formatics)技术筛选并克隆NS5ATP6反式激活的新型靶基因.以NS5ATP6表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5ATP6转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa Ⅰ酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接, 构建cDN...

• 单位
  解放军第302医院