摘要

目的 观察玻璃体腔注射肝细胞生长因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(HGF-MSCs)对糖尿病大鼠视网膜组织肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,探讨HGF-MSCs对大鼠Ⅱ型糖尿病性视网膜病变的作用。方法 体外分离、培养人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)并鉴定。采用感染复数值(MOI)50的慢病毒载体转染hUCMSCs。4周龄SD雄性大鼠,按照随机数字表法分为正常组(8只),糖尿病组(60只),糖尿病组又分为糖尿病对照组、PBS组、MSCs组和HGF-MSCs组(每组15只)。糖尿病组大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。建模3个月后对糖尿病组进行后续实验。糖尿病对照组不行特殊治疗,PBS组玻璃体腔注射磷酸盐缓冲液,MSCs组玻璃体腔注射hUCMSCs, HGF-MSCs组玻璃体腔注射HGF-MSCs。干预2、4、6周后行荧光定量PCR检测大鼠视网膜组织HGF mRNA的表达;Western blot检测大鼠视网膜组织HGF的表达。结果 培养的脐带间充质干细胞可以诱导分化为成骨细胞、成脂肪细胞。MOI 50的慢病毒成功转染hUCMSCs。大鼠视网膜荧光定量PCR和Western blot结果显示:在同一时间点,与其他组相比,正常组大鼠视网膜的HGF及其mRNA的表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。在同一时间点,与其他组相比,HGF-MSCs组大鼠视网膜的HGF及其mRNA的表达明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。不同时间点各组大鼠视网膜HGF及其mRNA的表达差异没有统计学意义(P>0.05)。结论 糖尿病大鼠视网膜HGF及其mRNA的表达增加。单纯玻璃体腔注射hUCMSCs,不影响糖尿病大鼠视网膜HGF及其mRNA的表达。玻璃体腔注射HGF修饰的hUCMSCs,可以促进糖尿病大鼠视网膜HGF及其mRNA的表达,可能与HGF相互作用减轻糖尿病视网膜病变的早期病变发展。