AOPE基因定点突变质粒的构建及qPCR鉴定

作者：覃鸿妮; 谢钰珍; 杜雅馨

来源：科技风, 2018, (31): 213-215.

DOI：10.19392/j.cnki.1671-7341.201831183

• AOPE基因
• 定点突变
• 重组质粒
• qPCR鉴定

随机选取5份待检测老年痴呆症的唾液标本,等量混合后提取基因组DNA并通过PCR扩增人第19号染色体上的载脂蛋白E(AOPE)基因,再与PMD-19T质粒连接构建重组质粒,转入DH5α感受态细胞中。经菌液PCR和测序鉴定为阳性的克隆抽取其质粒,以此重组质粒为模板通过PCR对AOPE基因的rs7421位点G突变为T,构建的突变质粒经qPCR鉴定,得到相应的荧光值,不同基因型的结果分成三类聚类图:CC型(野生纯合),CR型(杂合突变)和RR型(纯合突变),将得到的荧光数据值上传到生物信息数据库当中,以此为依据可以从AOPE基因层面上对待检测对象的阿尔茨海默病发病风险做出评估。

• 单位
  苏州工业园区服务外包职业学院