miR-769-3p在膀胱癌组织中的表达及下调其表达对膀胱癌J82细胞迁移和细胞周期的影响

作者：袁琛; 张晓玲^*; 黄耿; 桂定文; 付金伦

来源：国际外科学杂志, 2022, 49(10): 658-662,C2.

DOI：10.3760/cma.j.cn115396-20220219-00052

• 膀胱肿瘤
• 微RNAs
• 细胞迁移
• 细胞周期

目的探究miR-769-3p在膀胱癌组织中的表达水平, 通过下调膀胱癌J82细胞中miR-769-3p表达水平, 观察沉默miR-769-3p对J82细胞迁移能力和细胞周期的影响。方法采用OncomiR数据库分析miR-769-3p在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达差异。通过Lipofectamine 2000转染试剂转染J82细胞, 分为si-miR-769-3p组(转染miR-769-3p小分子干扰片段)和对照组(转染无意义序列)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测转染后miR-769-3p相对表达水平。通过细胞划痕实验和流式细胞仪检测比较两组J82细胞迁移能力和细胞周期的差异性。采用生物信息学软件MicroRNAdb预测miR-769-3p的靶基因。双荧光素酶报告基因实验验证miR-769-3p与靶基因的互补结合。qRT-PCR和Western blotting分别检测miR-769-3p的靶基因表达水平。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 两组间比较采用t检验。结果与癌旁组织相比, miR-769-3p在膀胱癌组织中表达显著升高, 差异具有统计学意义(P<0.01)。si-miR-769-3p组miR-769-3p相对表达水平(1.02±0.16)明显低于对照组(4.50±0.60), 差异具有统计学意义(P<0.01)。si-miR-769-3p组细胞迁移率[(26.67±3.98)%]明显低于对照组[(61.86±4.70)%], 差异具有统计学意义(P<0.01)。si-miR-769-3p组处于G0～G1期的细胞比例[(57.66±5.74)%]显著多于对照组[(31.26±3.24)%], 差异具有统计学意义(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实内皮素3(EDN3)是miR-769-3p的靶基因。对照组和si-miR-769-3p组J82细胞中EDN3 mRNA相对表达水平为1.99±0.66和6.98±0.76, 与对照组比较, si-miR-769-3p组EDN3 mRNA相对表达水平明显高于对照组, 差异具有统计学意义(P<0.01)。结论低表达miR-769-3p可以通过促进EDN3基因表达抑制膀胱癌J82细胞迁移能力, 阻滞J82细胞周期。

• 单位
  黄石市中心医院; 武汉科技大学; 湖北理工学院