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摘要
胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factors 2, IGF2)在多种细胞生长、分化和合成代谢的调节中发挥重要的调控作用。本研究成功构建了淡水珍珠贝三角帆蚌IGF2的重组质粒pEGFP-IGF2和pET32a-IGF2,通过pEGFP-IGF2-细胞转染，表明该蛋白定位在细胞质与细胞核中。将pET32a-IGF2转化到BL21 (DE3)中进行蛋白诱导表达，成功得到其原核表达载体，SDS-PAGE检测显示，在约25ku处有一条清晰的条带，符合目的条带大小(26.27 ku),且主要表达于上清液中。为研究重组蛋白IGF2对三角帆蚌细胞活性的作用，通过CCK8细胞活性测定，进一步探讨了添加不同质量浓度重组目的蛋白(0、2.5、5.0、7.5、 12.5、17.5、 22.5μg/mL)培养的三角帆蚌外套膜细胞增殖活性。结果显示，三角帆蚌IGF2重组蛋白能显著促进三角帆蚌外套膜细胞的增殖活性(P<0.05),且在其质量浓度为12.5μg/mL时对三角帆蚌外套膜细胞的促生长效果最佳，这为促进三角帆蚌外套膜细胞传代、细胞系建立奠定了基础，也为下一步探究IGF2在贝类中的功能提供依据。
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