PKC通过调控TRPC/Ca2+通道影响iPS-mpMSC-fbs分化为功能性胰岛β细胞的机制研究

作者：郭鹏; 谭烨; 李文婧; 丁钧^*

来源：重庆医学, 2023, 52(09): 1298-1308.

• 1型糖尿病
• 多能干细胞
• 转录因子
• 间充质干细胞
• 成纤维细胞
• 蛋白激酶
• 胰岛β细胞

目的 探讨影响诱导性多能干细胞-间充质样-成纤维细胞(iPS-mpMSC-fbs)分化为功能性胰岛β细胞的分子机制。方法 从健康成年小鼠胰腺中分离纯化间充质样-成纤维细胞(mpMSC-fbs),通过慢病毒将Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4 4种转录因子转染至mpMSC-fbs,诱导mpMSC-fbs转变为诱导性多能干性球体细胞(iPS-mpMSC-fbs),并通过免疫荧光染色实验和Western blot检测其是否表达瞬时受体离子电位通道蛋白(TRPCs);分别将蛋白激酶C(PKC)激动剂佛波醇酯(PMA)和拮抗剂(Bis-1)与iPS-mpMSC-fbs共孵育，通过荧光影像系统测定细胞内游离钙离子(Ca2+)水平，观察PKC对iPS-mpMSC-fbs TRPC/Ca2+通道的调节关系。结果 从成年小鼠胰腺中成功分离纯化mpMSC-fbs,该细胞群与骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)有相似表面标志物(CD90、CD105和CD146),并成功将mpMSC-fbs诱导为iPS-mpMSC-fbs,且诱导后细胞表达TRPCs(TRPC1、TRPC3和TRPC4)。iPS-mpMSC-fbs与PKC激动剂PMA共孵育后，使用磷脂酶C(PLC)/Diac途径刺激可见细胞内Ca2+未出现第2高峰；而与PKC抑制剂(Bis-1)共孵育后，使用PLC/Diac途径刺激细胞内Ca2+出现第2高峰。结论 PKC可负性调控TRPC/Ca2+通道，从而影响iPS-mpMSC-fbs分化为功能性胰岛β细胞。

• 单位
  重庆医科大学