摘要
目的探讨通过脑微注神经干细胞(NSC)治疗缺血性脑卒中,检测注射神经干细胞在脑内的示踪情况。方法体外实验部分:利用原代小鼠NSC包载超顺磁性氧化铁(SPIO),CCK-8法检测SPIO在NSC中的细胞毒性。普鲁士蓝染色以及核磁共振成像(MRI)凝胶实验检测SPIO的摄取率;采用电感耦合等离子体质谱仪检测神经干细胞内的铁含量。体内实验部分:利用雄性C57BL/6小鼠构建缺血性脑卒中模型,脑微注射NSC(每只1×106细胞),采用MRI观测标记NSC示踪情况。近红外仪器观测注射GFP NSC的成像,通过影像配准等分析手段,研究多模态影像的特征信息随时间变化的规律。普鲁士蓝染色分析脑组织中的SPIO的表达,从病理学角度评价注射的NSC在缺血性脑卒中的示踪情况。结果通过体外实验,SPIO标记率随浓度增加而增加。SPIO选用浓度为200 mg·L-1,标记率达到100%;通过影像学多模态的观测,注射的NSC到达缺血梗死区域,实时观测NSC在体内的示踪;通过病理切片,普鲁士蓝染色分析脑组织中的SPIO表达,并且在缺血梗死区检测到SPIO的信号,进一步评价注射NSC在体内的示踪。结论采用SPIO作为示踪剂,在动物模型中脑微注射NSC,借助MRI、荧光成像技术和普鲁士蓝染色可检测超顺磁氧化铁标记的NSC的示踪。
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