川芎嗪对人非小细胞肺癌耐药细胞株A549/DDP的相关ATP结合盒转运体表达水平的影响

作者：王小梅; 薛春苗; 王艳梅; 梁玲; 张寒蕾; 梁艳^*

来源：山东中医药大学学报, 2023, 47(01): 64-70.

DOI：10.16294/j.cnki.1007-659x.2023.01.013

• 非小细胞肺癌
• 化疗耐药
• 川芎嗪
• 逆转耐药
• 顺铂
• ATP结合盒转运体

目的：观察川芎嗪（四甲基吡嗪）对耐药相关ATP结合盒转运体B1(ABCB1)、C1(ABCC1)和G2(ABCG2)表达水平的影响，揭示其逆转人非小细胞肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP耐药的机制。方法：采用细胞增殖（CCK8）实验，分析人肺腺癌细胞株A549及顺铂耐药株A549/DDP对顺铂的耐受性，计算耐药指数。分析A549/DDP对川芎嗪的耐受性，遴选逆转耐药所需的工作浓度并检测逆转效果。设置空白组接种A549细胞，模型组、实验组和阳性对照组均接种A549/DDP细胞；空白组和模型组均用1640完全培养基孵育，实验组用含工作浓度川芎嗪的1640完全培养基孵育，阳性对照组用含Tariquidar的1640完全培养基孵育。提取各组全部蛋白及mRNA，用免疫印迹法（Western Blot）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析川芎嗪对ABCB1、ABCC1和ABCG2及其m RNA表达水平的影响。结果：A549细胞对顺铂的半数抑制浓度（IC50）为（28.33±3.19）μM,A549/DDP对顺铂的IC50为（983.43±101.67）μM,A549/DDP的耐药指数为34.71。当川芎嗪浓度不高于150μM时，A549/DDP细胞活性无影响，遴选100μM为川芎嗪逆转耐药的工作浓度，1μM作为阳性对照药Tariquidar的工作浓度。川芎嗪逆转耐药指数为7.68,Tariquidar为5.74。Western Blot实验发现，模型组ABCB1、ABCC1和ABCG2的表达水平均高于空白组，在实验组和阳性对照组中均不同程度下调，差异有统计学意义（P<0.05）。RT-PCT实验显示，实验组和阳性对照组ABCB1和ABCC1 mRNA的表达水平与模型组比较均有不同程度的下调（P<0.05），但ABCG2 mRNA的表达水未见明显变化（P> 0.05）。结论：川芎嗪可下调ABCB1、ABCC1和ABCG2的表达水平，此可能为逆转A549/DDP细胞对顺铂耐受性的机制之一。

• 单位
  北京中医药大学东直门医院