不同交联剂处理对脱细胞小肠黏膜下层多孔支架的影响

作者：邓艺; 张一; 李博文; 王梅; 唐琳; 刘玉华^*

来源：北京大学学报(医学版), 2022, 54(03): 557-564.

DOI：10.19723/j.issn.1671-167X.2022.03.024

• 脱细胞小肠黏膜下层
• 多孔支架
• 戊二醛
• 碳二亚胺
• 原花青素

目的：探讨不同交联剂处理对脱细胞小肠黏膜下层(decellularized small intestinal submucosa, SIS)多孔支架理化性能及生物相容性的影响。方法：(1)将新鲜SIS塑形为三维多孔支架并采用戊二醛(glutaraldehyde, GA)、碳二亚胺[1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide, EDC]和原花青素(procyanidine, PA)3种交联剂进行交联，获得3组交联后支架，分别为GA组、EDC组和PA组。(2)理化性能评价：对3组多孔支架进行宏观形貌观察，使用场发射环境扫描电镜进行微观形貌观察并测定孔径及孔隙率，使用茚三酮法测定交联度，使用酶促降解法评价抗降解性能，使用万能力学测试机测定应力应变曲线及压缩强度。(3)生物相容性评价：使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8, CCK-8)法检测交联处理对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells, hBMSCs)增殖的影响，使用Calcein-AM/PI活死细胞染色法评价交联处理后支架的细胞毒性。结果：宏观形貌观察可见交联修饰未破坏支架三维结构；微观形貌观察可见各组多孔支架具有大小均匀、相互连通的孔隙结构。EDC组孔径最大，与另两组差异具有统计学意义(P<0.05);PA组孔隙率最低，与另两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。PA组交联度最高而溶胀率最低，EDC组溶胀率最高。EDC组和GA组的体外降解速率均高于PA组，其中GA组降解速度最快，PA组抗降解能力最佳，降解至第15天时3组质量丧失率间的差异有统计学意义(P<0.05)。EDC组和GA组压缩强度近似，PA组压缩强度最高，与另两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。GA组支架的细胞毒性最大，hBMSCs在EDC组和PA组支架上具有更好的增殖能力，在GA组增殖较慢。结论：3种交联剂处理均可达到较高的交联度，经EDC和PA交联处理的SIS多孔支架在拥有较好理化性能的同时具有良好的生物相容性，相比于GA是更有应用前景的交联处理方法。

• 单位
  北京大学