摘要

目的 探讨黄连解毒汤对脓毒症肺损伤的保护作用及其机制。方法 雄性SD大鼠被随机分为假手术组(Sham)、模型组(CLP组)、黄连解毒汤组(H+CLP组),雷帕霉素组(H+Rap组)和3-甲基腺嘌呤组(H+3-MA组),每组各7只。除Sham组外,其他组均使用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型。H+CLP组、H+Rap组和H+3-MA组术前一周开始灌胃给药,其他组给等量生理盐水。术后1h按分组分别腹腔注射相应药物或等量生理盐水。术后24h取材,检测大鼠肺部组织湿干重之比;Elisa法检测肺部组织炎症因子白介素6(interleukin-6, IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(tumornecrosis factor-α, TNF-α)的水平;HE染色观察肺组织病理形态学变化;透射电镜观察肺部细胞亚显微结构,主要是自噬小体的形成情况;蛋白印迹法检测肺组织中自噬相关蛋白的表达情况,包括微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3)、Beclin-1、P62。结果 与Sham组相比,CLP组大鼠肺部出现明显的水肿,肺部组织湿干重之比、促炎因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平和组织病理学损伤均显著增加(P<0.05),而自噬小体数量和肺部组织的自噬水平均显著下降(P<0.05);与CLP组相比,H+CLP组大鼠肺部的水肿、炎症因子和组织病理损伤情况都有明显的改善(P<0.05),与此同时自噬小体的数量和自噬的水平均明显有所提高(P<0.05);Rap激活自噬后,HLJDD的治疗效果进一步提高,而3-MA抑制自噬则具有相反的作用。结论 HLJDD可能通过激活自噬途径来减轻脓毒症急性肺损伤。