摘要
【目的】设计用于扩增地中海实蝇的特异性引物,建立快速、灵敏检测地中海实蝇的实时荧光PCR方法。【方法】采用实蝇科昆虫线粒体DNA COI基因的通用引物扩增地中海实蝇以及其它三种供试实蝇的DNA片段,经测序、比对分析,设计出扩增地中海实蝇的特异性引物,用SYBR Green实时荧光PCR方法验证该引物的特异性与灵敏度。【结果】设计的引物对DZH-F/DZH-R能特异性检测出地中海实蝇,扩增产物的溶解曲线峰值Tm为79.2。该对引物检测地中海实蝇的灵敏度为10-3ng/μL。【结论】所建立的SYBR Green实时荧光PCR方法检测地中海实蝇特异性强、灵敏度高。
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单位新疆出入境检验检疫局; 新疆农业大学