丹参含药血清抑制瘦素及Hh信号通路激活诱导的大鼠肝星状细胞中EVC2和Gli2表达上调

作者：韩仕庆; 曹文富; 冯藜枥

来源：中国组织化学与细胞化学杂志, 2016, 25(02): 118-124.

DOI：10.16705/j.cnki.1004-1850.2016.02.004

• Hh信号通路
• 肝星状细胞
• EVC2
• Gli2
• 肝纤维化

目的观察丹参含药血清是否可以通过抑制瘦素诱导的刺猬(Hedgehog,Hh)信号通路中纤毛蛋白(Ellis-van creveld syndrome protein 2,EVC2)和锌指转录因子2(GLI family zinc fingerprotein 2,Gli2)的表达从而抑制大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)的增殖。方法丹参水煎剂、生理盐水灌胃大鼠10天后收集各组血清。应用高效液相色谱仪检测丹参含药血清中有效成分(丹参素、丹参酮IIA)的含量。将处于对数生长期的HSCs传代于6孔板,分为6组(空白对照组、瘦素组、瘦素+抑制剂组、瘦素+丹参组、瘦素+激动剂组、瘦素+激动剂+丹参组),每组分别培养在相应含药血清中,24h后收集细胞。采用MTT检测细胞增殖情况,免疫荧光检测EVC2在各组HSCs中的表达,Western blot测定EVC2和Gli2蛋白水平,RT-PCR法检测EVC2和Gli2 mRNA水平。结果瘦素能刺激HSCs的活化增殖,使EVC2和Gli2表达量显著升高;Hh通路抑制剂和丹参能抑制瘦素对HSCs增殖的活化作用和对EVC2、Gli2表达的上调作用;丹参对Hh通路激动剂与瘦素共同作用所致的HSCs增殖极强活化和EVC2、Gli2表达极强上调也具有明显抑制作用。结论丹参可以通过抑制Hh信号通路中EVC2、Gli2的表达,从而对活化的HSCs产生抑制作用。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 医药学院; 重庆医科大学