NDV或H9N2 AIV感染对坦布苏病毒继发感染宿主单核-巨噬细胞的影响

作者：张艳慧; 马勇; 梁雨萌; 崔露; 陈志杰; 李雪峰; 胥利; 刘柘一; 刘胜旺^*; 李海^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2022, (19): 15-139.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.12.0114

• 坦布苏病毒
• 新城疫病毒
• H9N2禽流感病毒
• 混合感染
• 单核-巨噬细胞

为研究新城疫病毒(NDV)或H9N2禽流感病毒(AIV)对坦布苏病毒(TMUV)继发感染宿主单核-巨噬细胞的影响及其潜在机制，试验通过实时荧光定量PCR方法检测NDV或H9N2 AIV预先感染鸭单核-巨噬细胞和HD11细胞后再感染TMUV 12,24小时时的TMUV基因组拷贝数，分析是否可用HD11细胞替代鸭单核-巨噬细胞进行后续试验；分别通过高分辨率活细胞共聚焦显微镜和ELISA检测NDV和H9N2 AIV感染12,24 h对HD11细胞中活性氧(ROS)和Ⅰ型干扰素(IFN)含量的影响；通过实时荧光定量PCR方法分别检测PMA、外源Ⅰ型IFN与细胞共孵育后，感染TMUV 12,24小时时ROS和24小时时Ⅰ型IFN对TMUV基因组在细胞中复制的影响。结果表明：感染12,24小时时，在鸭单核-巨噬细胞中，NDV混合感染组的TMUV基因组拷贝数极显著低于TMUV单独感染组(P<0.01);感染12,24小时，H9N2 AIV混合感染组的TMUV基因组拷贝数分别显著和极显著低于TMUV单独感染组(P<0.05,P<0.01)。在HD11细胞中，NDV混合感染组的TMUV基因组拷贝数分别显著和极显著低于TMUV单独感染组(P<0.05,P<0.01);H9N2 AIV混合感染组的TMUV基因组拷贝数极显著低于TMUV单独感染组(P<0.01)。感染12,24小时时，NDV和H9N2 AIV均可极显著提高HD11细胞中ROS的含量(P<0.01)。感染24小时时，NDV可显著提高IFN-α的含量(P<0.05),感染12,24小时时，NDV可极显著提高IFN-β的含量(P<0.01);H9N2 AIV可在感染12,24小时时极显著提高IFN-β的含量(P<0.01)。ROS可在感染TMUV 12,24小时时极显著抑制TMUV基因组的复制(P<0.01),Ⅰ型IFN可在感染TMUV 24小时时显著抑制TMUV基因组的复制(P<0.05)。说明可用HD11细胞替代鸭单核-巨噬细胞进行后续试验；在鸭单核-巨噬细胞中，NDV或H9N2 AIV感染均可以有效抑制TMUV基因组的复制，其作用可能是通过提高ROS和Ⅰ型IFN含量实现的。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室