摘要
目的观察XB130表达上调后人肝癌细胞Hep G2增殖和凋亡的变化,并探讨其作用机制。方法Western blot及实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测肝癌细胞株中XB130表达;构建过表达质粒p CMVEGFP-XB130转染Hep G2细胞,实验分为p CMV-EGFP-XB130组(p CMV-EGFP-XB130转染),空白对照组(EGFP转染)。以免疫荧光、Western blot法及q RT-PCR法检测上调效率。Western blot法检测PI3K/Akt通路相关基因表达;采用MTT法检测转染后细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 XB130蛋白及其m RNA在肝癌细胞株Hep3B、Huh7、Hep G2和MHCC97H中均有表达,在Hep G2细胞株中表达量最低(F=6.342和5.424,均P=0.001)。与EGFP组比较,p CMV-EGFP-XB130组中p-p21、p-p27、p-FOXO3a及Pro Capase-9蛋白表达上调(t=4.652,3.558,6.743和3.021,均P<0.05);XB130表达上调后在72及96 h Hep G2细胞增殖能力增强(t=4.752和8.542,均P=0.001);XB130表达上调后Hep G2细胞凋亡率降低(t=7.467,P=0.001)。结论 XB130表达上调通过PI3K/Akt信号通路促进肝细胞癌细胞增殖,抑制凋亡。
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