摘要
目的建立检测载脂蛋白L1(APOL1)的ELISA方法,探讨肠道病毒71型(EV71)感染患儿血液中APOL1的含量与EV71感染程度的关系。方法合成APOL1多肽,采用经典方法制备APOL1单克隆抗体,建立检测APOL1蛋白的双抗体夹心ELISA方法,并检测EV71感染的临床血样68份。结果筛选出5B5和7A9两个特异性的单克隆抗体,据此建立ELISA双抗体夹心检测方法。在78.125~5 000 ng/mL范围内,APOL1蛋白浓度有较好的检测线性,批内和批间变异系数不超过10%。在EV71-IgM阳性组和弱阳性组感染患儿血清中,APOL1含量分别为(1 008.00±18.34)ng/mL和(885.80±15.76)ng/mL,两组血清中的APOL1含量差异有统计学意义(P<0.05)。结论建立了稳定可靠用于检测血清中APOL1蛋白的双抗体夹心ELISA方法。EV71-IgM抗体阳性组患儿血清中APOL1含量明显高于弱阳性组,提示APOL1含量和EV71感染程度具有一定相关性。
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单位南方医科大学南方医院; 南方医科大学; 公共卫生学院