水牛生长分化因子9成熟肽基因克隆及重组蛋白质和多克隆抗体的制备

作者：刘玉鹏; 彭中友; 郭日红; 雷明明; 于建宁; 陈瑞爱; 施振旦

来源：江苏农业学报, 2013, (02): 346-351.

• 生长分化因子9
• 成熟肽
• 克隆和表达
• 多克隆抗体 GDF9
• mature peptide
• cloning and expression
• polyclonal antibody

为了获得水牛生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF9)重组蛋白质和抗GDF9抗体,根据GDF9基因编码区序列(GenBank:FJ529501.1)设计1对引物,用水牛基因组DNA为模板扩增水牛GDF9成熟肽基因序列,并与其他反刍动物的GDF9成熟肽基因序列进行同源性比较。将该序列克隆到表达载体pRSET-A的BamHⅠ和HindⅢ酶切位点之间以构建重组表达载体,并将重组表达载体转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),转化菌经IPTG诱导表达重组蛋白质。经Ni-NTA凝胶纯化后的重组蛋白质与矿物油佐剂混合免疫新西兰兔制备抗GDF9抗血清,使...

• 单位
  江苏省农业科学院; 肇庆大华农生物药品有限公司; 华南农业大学