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摘要
文章旨在从红胞藻中分离纯化得到试剂级的藻红蛋白，并对其相关性质进行研究。以红胞藻为原料，采用反复冻融、硫酸铵盐析和疏水层析的方法分离纯化藻红蛋白，并对其稳定性进行研究。结果表明，红胞藻经过4次反复冻融后藻红蛋白溶出率最高，两步硫酸铵分级沉淀可使藻红蛋白纯度(A545/A280)提高到2.45，进一步采用Butyl-S-QZT 6FF疏水层析纯化后藻红蛋白纯度(A545/A280)达到试剂级，为6.63，回收率为48.9%。纯化的藻红蛋白在545 nm处有最大特征吸收峰，荧光激发峰位于541 nm和553 nm处，发射峰位于587.5 nm处，二级结构主要以α-螺旋的形式存在。藻红蛋白含有3个亚基，分子质量分别为9、10 ku和20 ku，在30～50℃、pH6～8条件下能保持相对稳定。Cu2+对藻红蛋白的光谱学性质有一定的影响，在Ca2+、Mn2+、Zn2+、Fe2+、Fe3+等离子存在时，藻红蛋白光谱学性质没有发生明显变化。结论：采用硫酸铵分级沉淀结合一步疏水层析获得了试剂级的藻红蛋白，得率高，工艺简便。研究结果为红胞藻藻红蛋白的大规模生产提供了参考。
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