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摘要
为解决猪流行性腹泻的早期现场检验难题，试验通过三羟甲基氨基甲烷(Tris)辅助法制备新型胶体金作为标记物，建立了一种用于猪粪便中猪流行性腹泻病毒(PEDV)现场快速检测的胶体金免疫层析技术，并对标记pH值和蛋白量等工艺进行优化，考察方法的敏感性、特异性和准确性。结果显示，所建立的PEDV免疫层析方法可在15 min内检出猪粪便中的PEDV病原，最低检测限为1×102 TCID50/mL，与猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、沙门氏菌等常见病原无交叉反应，批内与批间检测结果无明显差异；对107份临床粪便、粪便拭子和肠道组织等样品检测结果与RT-PCR检测结果的符合率为100%。研究表明，所建立的基于新型胶体金标记的PEDV免疫层析试纸条敏感性高、特异性强、重复性好、操作简便快捷，适用于基层养殖场PEDV腹泻的现场快速诊断。
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