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摘要
目的 观察高糖、高胰岛素环境下原代成骨细胞葡萄糖转运蛋白(Glut)4、骨钙素(BGP)、Ⅰ型胶原蛋白(CoiⅠ)等蛋白表达，研究成骨细胞自身葡萄糖代谢对成骨功能的影响。方法 原代小鼠成骨细胞分离提取后体外诱导培养，培养成熟后分为4组，正常对照组(N组)、高胰岛素组(Y组)、高糖组(T组)、高糖高胰岛素组(D组),分别诱导6 h和24 h,用Western印迹检测各组细胞Glut4的表达，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BGP、CoiⅠ的含量，碱性磷酸酶染色观察成骨细胞形态，茜素红染色观察细胞外基质矿化结节情况。结果 细胞诱导6 h,与N组相比，Y组、T组、D组细胞Glut4表达明显增加(P<0.05),诱导24 h后Y组Glut4表达明显增加，T组Glut4蛋白表达明显减低(P<0.05),D组与N组相比无明显差异；细胞诱导6 h,与N组相比，T组、D组BGP分泌明显增加(P<0.05),诱导24 h后Y组细胞BGP分泌明显增加，T组细胞BGP分泌明显降低(P<0.05),D组与N组相比无差异；与N组相比，不同诱导时间Y组、T组、D组CoiⅠ分泌无明显差异。结论 葡萄糖代谢关键蛋白Glut4表达调节成骨细胞特异功能蛋白BGP分泌，通过改善成骨细胞自身葡萄糖代谢促进基质合成和矿化，成骨细胞葡萄糖代谢关键蛋白Glut4有望成为糖尿病骨质疏松治疗的新靶点。
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