人血清白蛋白与促红细胞生成素融合蛋白的构建及表达

作者：黄迎春; 苟兴华; 韩蕾; 李德华; 赵兰英; 吴洽庆

来源：四川大学学报（医学版）, 2011, (03): 317-321.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2011.03.001

• 血清白蛋白
• 促红细胞生成素
• 融合蛋白
• CHO细胞 Human serum album Erythropoietin Fusion protein CHO cell

目的构建重组人血清白蛋白促红细胞生成素融合蛋白(HSA-EPO)表达载体,用CHO细胞表达该重组蛋白。方法 PCR扩增出人血清白蛋白基因(HSA)和促红细胞生成素基因(EPO);合成编码多肽GS(GGGGS)3的DNA片段作为接头(Linker),采用重叠PCR的方法将Linker与EPO基因拼接成LEPO基因。HSA与LEPO基因通过BamHⅠ酶切位点相连成HSA-EPO融合基因;将该融合基因插入表达载体pCI-neo构建为表达质粒pCI-HLE。脂质体转染CHO细胞,以G418抗性筛选转染细胞。用PCR及Western blot方法鉴定被转染CHO细胞,以ELISA方法检测被转染CHO细胞...

• 单位
  成都地奥制药集团有限公司; 四川大学华西医院