摘要
micro RNA(mi RNA)是一类内源性的非编码RNA,广泛参与细胞的生长发育、分化、增殖和凋亡等生物学过程。为了研究mi R-let-7a对猪(Sus scrofa)甲状腺的生长发育及甲状腺细胞凋亡的调控作用,本研究利用免疫荧光技术鉴定了大白猪的甲状腺组织及体外培养的甲状腺细胞,利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测了mi R-let-7a在不同生长阶段大白猪甲状腺组织中的表达量变化,通过转染mi R-let-7a mimics并利用流式细胞术检测了转染组与未转染组的甲状腺细胞凋亡率的差异性,同时预测了mi R-let-7a与细胞凋亡相关基因的靶向关系。结果发现,甲状腺组织和细胞中的甲状腺球蛋白(thyroglobulin,TG)发出绿色荧光,表明体外培养的甲状腺细胞功能正常。q RT-PCR结果显示,胚胎期随着胚龄的增加,mi R-let-7a表达量逐渐增加。出生后mi R-let-7a表达量下降,于60日龄达生长期最小值,之后有所上升,至90日龄后其表达量再次下降,120日龄后随日龄的增加let-7a表达量呈现逐渐增加的趋势。凋亡结果发现,和对照组相比,转染组细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。根据研究结果推测,mi R-let-7a的表达直接或间接影响了甲状腺细胞凋亡的调控过程。研究结果为深入研究猪甲状腺mi R-let-7a的功能机制提供了有益的线索。
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