SWELL1真核表达载体的构建及其在哺乳动物细胞的表达

作者：夏忠雪; 王胜; 周雁红; 林小珍; 姜晓明; 丁旭; 聂文营; 郝峰^*

来源：中国兽医杂志, 2020, 56(03): 49-137.

• SWELL1
• FRT细胞
• 荧光淬灭动力学试验
• 容积调控性氯离子通道

为研究SWELL1容积调控性氯离子通道在多种哺乳动物细胞的表达情况,最终获得表达及功能俱佳的细胞模型。反转录PCR方法从SJSA 1细胞中获得目的基因SWELL1,应用基因同源重组技术将SWELL1克隆入真核表达载体pCMV3-RFP,测序结果表明,成功构建SWELL1真核表达载体;SWELL1转染至HEK293、CHO和FRT细胞中,抗生素筛选和有限稀释后,获得表达SWELL1细胞株;倒置荧光显微镜观察SWELL1的表达情况,并应用荧光淬灭动力学试验检测SWELL1的离子转运功能。结果表明FRT细胞为研究SWELL1的最佳细胞模型,SWELL1是容积调控性氯离子通道的分子基础,具有经典容积调控性氯离子通道的特性。

• 单位
  北华大学; 吉林医药学院; 吉林省肿瘤医院