摘要
逆转录-实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)已经广泛应用于核酸检测。然而,如何实现准确、快速即时检测仍然是亟待解决的关键问题。本研究设计了一种使用胍基修饰的荧光碳点(GCDs),用于高灵敏度以及高特异性的快速核酸检测。当GCDs与分子信标(Beacon)通过氢键作用结合后,GCDs的荧光被Beacon的荧光基团淬灭。当遇到目标核酸(Target DNA)之后,Beacon与Target DNA进行碱基互补配对,GCDs与Beacon脱离,GCDs自身荧光恢复。基于这种灵敏的荧光“off-on”,可实现在5 min内快速准确核酸检测,并可检测到体系内0.005 fmol·L-1 (约300 copys·mL-1)的核酸序列,相比于RT-qPCR所需要的2–4h,该方法不需要进行核酸扩增,缩短了检测时间,有望为目前的核酸检测提供一个便捷有效的方法。
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单位中国医学科学院北京协和医学院; 北京师范大学