miR-34a介导Bcl-2促原代听觉皮层神经元凋亡的作用

作者：黄秋红; 叶咏怡; 郑亿庆

来源：中国耳鼻咽喉头颈外科, 2017, 24(12): 625-628.

DOI：10.16066/j.1672-7002.2017.12.006

• 动物实验
• 老年性聋
• 听觉皮质
• 神经元
• 细胞凋亡
• B细胞淋巴瘤-2蛋白

目的探讨miR-34a通过下调Bcl-2表达,介导原代听觉皮层神经元凋亡在年龄相关性聋中枢发病机制中的可能作用。方法采用C57BL/6乳鼠,定位获得听觉皮层脑组织,进行原代神经元培养,并通过对原代神经元进行转染,过表达miR-34a或干扰下调miR-34a表达后,采用western blot进行靶基因Bcl-2蛋白水平检测,采用Hoechst染色行细胞凋亡检测。结果酶消化法可分离并获得原代皮层神经元,将原代神经元进行转染,采用western blot检测转染过表达miRNA-34a后Bcl-2表达情况,转染48 h和72 h后Bcl-2表达均下降,5 nmol/L浓度与阴性对照比较,差异有统计学意义(t=5.127,P<0.05),10 nmol/L与20 nmol/L浓度比较,差异有统计学意义(t=6.379,P<0.05)。抑制表达mi RNA-34a,Bcl-2表达均升高,5 nmol/L浓度与阴性对照比较,差异有统计学意义(t=4.926,P<0.05);10 nmol/L与20 nmol/L浓度比较,差异有统计学意义(t=5.821,P<0.05),免疫荧光检测Bcl-2表达也显示相似结果。细胞凋亡染色在过表达mi RNA-34a后,神经元核固缩,凋亡程度增加。结论 miR-34a通过下调Bcl-2表达,介导原代听觉皮层神经元凋亡,可能是年龄相关性聋中枢发病机制之一。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院; 中山大学