脂质-鱼精蛋白-DNA复合物的构建及其对细胞的体外转染

作者：孙逊; 张志荣

来源：药学学报, 2004, (10): 792-796.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2004.10.006

• 非病毒载体系统
• 脂质-鱼精蛋白-DNA复合物
• 转染率

目的 研究新型非病毒载体脂质-聚阳离子-DNA(LPD)复合物的制备方法及其对体外细胞的转染率。方法 用薄膜-挤压法制备空白阳离子脂质体,与鱼精蛋白-DNA复合物在室温孵育后,得到LPD;用透射电镜观察其形态,用激光粒度仪测定其粒径和zeta电位;LPD与DNA酶I溶液在37℃下孵育不同时间后,用琼脂糖凝胶电泳观察其降解情况;用荧光法测定其包封率;用X-gal染色法考察了LPD对张氏(Chang)肝细胞,HepG2肝癌细胞和SMMC-7721肝癌细胞的转染率。结果 LPD的形态近似于球体,平均粒径为143.5 nm,平均zeta电位为+32.6 mV;37℃下核酸酶作用2 h后,LPD中的DNA几乎无降解;平均包封率为93.42％;LPD对张氏(Chang)肝细胞、HepG2肝癌细胞和SMMC-7721肝癌细胞的转染率分别为(69±6)％,(43±7)％和(96.2±1.8)％。结论 LPD是一种制备工艺简单、体外稳定性好、转染率高,具有应用潜力的非病毒载体系统。

• 单位
  四川大学