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摘要
目的 探讨脑梗死大鼠早期静脉移植同种异体骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)后皮层梗死区表达脑源性神经营养因子(BDNF)的主要细胞类型及BM-MSCs移植对其数量和比例的影响。方法 (1)实验一：将15只SD大鼠按随机数字表法分为假手术1组、梗死对照1组、BM-MSCs移植1组,每组5只。后2组制备成远端大脑中动脉闭塞模型,BM-MSCs移植1组于造模后1 h经尾静脉注射1×106个细胞标记试剂CM-DiI(红色荧光)标记的BM-MSCs。各组大鼠于造模后48 h灌注取脑,采用免疫荧光染色检测皮层梗死区BDNF和CM-DiI标记的BM-MSCs的双标阳性染色情况。(2)实验二：将15只SD大鼠按随机数字表法分为假手术2组、梗死对照2组、BM-MSCs移植2组,每组5只。后2组制备成远端大脑中动脉闭塞模型,BM-MSCs移植2组于造模后1 h经尾静脉注射1×106个未标记的BM-MSCs。各组大鼠于造模后48 h灌注取脑,采用免疫荧光染色检测皮层梗死区BDNF和离子钙适配分子1(Iba-1)+、CD68+小胶质细胞及神经元特异核蛋白(NeuN)+神经元的双标阳性染色情况。结果 (1)BM-MSCs移植1组大鼠脑内可见红色荧光标记的BM-MSCs,散在分布于皮层梗死区及梗死周边区,其中皮层梗死区中约有9.70%±3.47%的BM-MSCs表达BDNF,占所有BDNF+细胞的13.32%±4.48%。(2)BM-MSCs移植2组大鼠脑内皮层梗死区中,38.40%±9.04%的BDNF+细胞为Iba-1+小胶质细胞,11.65%±2.76%的BDNF+细胞为CD68+小胶质细胞,28.96%±6.99%的BDNF+细胞为NeuN+神经元。BM-MSCs移植2组皮层梗死区BDNF+/Iba-1+小胶质细胞数量[(92.06±36.52)个/mm2]及其占全部Iba-1+小胶质细胞的比例(79.21%±12.27%)均明显高于梗死对照2组[(31.13±10.23)个/mm2、60.15%±28.20%],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 脑梗死大鼠早期静脉移植的同种异体BM-MSCs可迁移至脑内并在皮层梗死区表达BDNF,且该区域表达BDNF的其他细胞类型主要为神经元和小胶质细胞。BM-MSCs移植可促进分泌BDNF的Iba-1+小胶质细胞的数量和比例显著增加,这可能是其疗效产生的机制之一。
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单位苏北人民医院; 首都医科大学宣武医院; 神经内科
