miR-145负向调控宫颈癌细胞株Hela中C-myc的表达

作者：刘洋; 黄娅娟; 孙春意; 许长俊; 杨莹莹^*; 周红林^*

来源：昆明医科大学学报, 2019, 40(02): 44-48.

• miR-145
• C-myc
• 宫颈癌
• Hela
• 负性调控

目的观察mi R-145对宫颈癌Hela细胞C-myc表达的影响,探讨mi R-145对C-myc的调控作用。方法以RT-PCR检测法检测Hela细胞中mi R-145和C-myc m RNA的表达。运用West Blot检测法检测C-myc蛋白的表达情况;设计并合成mi R-145的模拟物和mi R-145的抑制剂,以及两者的空白对照序列(模拟对照,抑制剂对照),用脂质体Liposome2000分别包裹二者后以使其转染,同时设立空转Liposome2000用作对照。转染后24 h分别检测C-myc m RNA和蛋白的表达变化。实验数据采用单因素方差分析和t检验进行统计分析。结果Hela细胞中mi R-145和C-myc的表达呈阳性。转染24 h后,模拟组,模拟对照组,抑制剂组,抑制剂对照组及脂质体组中C-myc m RNA相对表达水平分别为(0.40±0.32)、(0.59±0.18)、(1. 22±0.38)、(0.73±0.25)和(0.48±0.15);蛋白相对表达水平分别为(0.30±0.17)、(0.50±0.17)、(1. 35±0.59)、(0.71±0.14)和(0.72±0.29);模拟组C-myc的m RNA和蛋白相对表达水平显着低于模拟对照组和脂质体组(P<0.05)。而C-myc的m RNA和蛋白在抑制剂组中的相对表达水平显着高于抑制剂对照组和脂质体组(P <0.05)。结论人宫颈癌Hela细胞株中, C-myc是mi R-145的靶基因, mi R-145通过下调C-myc m RNA及其蛋白的表达水平,发挥负向调控C-myc的作用。

• 单位
  昆明医科大学第二附属医院