牛传染性鼻气管炎病毒gB和gE基因双重荧光定量PCR检测方法的建立

作者：徐娜; 杨帆; 雷宇; 李平安; 关平原

来源：中国预防兽医学报, 2017, 39(07): 556-559.

• 牛传染性鼻气管炎
• gE、gB基因
• 荧光定量PCR

为建立牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）的双重荧光定量PCR检测方法,本研究根据Gen Bank中登录的IBRV g E和g B基因序列,设计2对特异性引物及Taq Man探针。结果显示,以含有gB、gE基因的重组质粒为模板绘制标准曲线,其相关系数（R2）均为0.999,有良好的线性关系。该方法仅对IBRV检测为阳性,而对牛支原体、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、巴氏杆菌、牛、羊布鲁氏菌检测结果均为阴性,表明其特异性强。该方法的敏感度约为2拷贝/μL,重复性试验表明该方法的组内和组间变异系数均小于2%。根据被OIE采纳的作为国际贸易规定的检测该病毒的荧光定量PCR方法与本实验建立的方法分别对30份牛肺样品进行检测,符合率可达81.8%。研究表明所建立的荧光定量PCR检测方法具有快速、敏感、准确等优点,可以用于IBRV的检测。

• 单位
  农业部; 内蒙古农业大学