地黄RgGGPPS2基因克隆、生物信息学分析及表达分析

作者：赵乐; 马利刚; 朱畇昊; 俎梦航; 冯卫生; 郑晓珂

来源：2016全国中医药生物化学与分子生物学年会.

• 地黄
• 环烯醚萜
• 生物合成
• RgGGPPS2基因
• 基因克隆
• 生物信息学
• 基因表达

为了研究地黄环烯醚萜生物合成途径的功能基因,从地黄中克隆了一条新的GGPPS基因(RgGGPPS2),进行生物信息学分析,原核表达、纯化及基因表达模式分析.RgGGPPS2基因的ORF为867bp,编码289个氨基酸.生物信息学分析结果发现RgGGPPS2蛋白含有2个富含天冬氨酸的基序FARM(first aspartate-rich motif)和SARM(second aspartate-rich motif),RgGGPPS2与芝麻、长春花等双子叶植物中GGPPS蛋白的同源性较高.通过构建pET-32a-RgGGPPS2原核表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达RgGGPPS2重组蛋白,利用Ni2+亲和层析得到了纯化的RgGGPPS2重组蛋白.荧光定量PCR结果显示RgGGPPS2基因在根中表达量最高,其次是叶,茎中最低.这为进一步研究RgGGPPS2基因在地黄环烯醚萜生物合成途径中的功能奠定了基础.

• 单位
  河南中医药大学