应用酵母双杂交系统筛选AMPK相互作用蛋白

作者：吴丽; 杨成红; 邓思思; 周宇波; 钱旻; 臧奕

来源：中国生物工程杂志, 2012, (02): 1-7.

DOI：10.13523/j.cb.20120201

• 一磷酸腺苷激活蛋白激酶
• 酵母双杂交
• 蛋白质相互作用 AMPK Yeast two hybrid Protein-protein interaction

一磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)是调节体内代谢平衡的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。应用酵母双杂交系统,以AMPKβ1亚基作为"诱饵"蛋白,筛选均一化的人源cDNA文库,寻找与AMPK相互作用的蛋白。通过对150个阳性克隆进行验证,最终得到了63个与AMPKβ1亚基相互作用的蛋白。其中,包括代谢酶、转录因子或转录相关蛋白、蛋白转运相关蛋白、GTP结合蛋白、支架蛋白、细胞周期调节蛋白、RNA结合蛋白等以及一些未知功能的蛋白。从酵母双杂交的结果来看,AMPK不仅在代谢领域,而且在许多非代谢领域,如核受体及其它转录因子的调节、信号转导、DNA修复及细胞周期调节等,可能都起到非常重要的作用。

• 单位
  国家新药筛选中心; 华东师范大学; 中国科学院; 中国科学院上海药物研究所