DAPT对耐雷帕霉素骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响

作者：张聃; 刘冲; 王军; 田强; 张广平; 詹新立

来源：华中科技大学学报(医学版), 2015, 44(06): 640-647.

• 雷帕霉素
• γ-分泌酶抑制剂
• 骨肉瘤
• p53

目的通过研究γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对耐雷帕霉素(RAPA)骨肉瘤细胞株增殖、凋亡的影响,探讨mTOR通路与Notch通路在骨肉瘤细胞增殖、凋亡中的关系。方法体外培养骨肉瘤MG63细胞株及建立耐雷帕霉素骨肉瘤MG63细胞株;噻唑蓝(MTT)比色法测定不同剂量雷帕霉素及DAPT对各细胞株增殖的影响;流式细胞仪检测不同剂量药物对各细胞株凋亡的影响;Western blot法检测各细胞株中p53的表达。结果 MTT法检测显示雷帕霉素及DAPT均能抑制各细胞株的增殖。流式细胞术检测结果表明雷帕霉素及DAPT均能诱导各细胞株发生凋亡,MG63细胞早、晚期凋亡率均与药物作用剂量呈正比,耐雷帕霉素MG63细胞仅在高浓度药物作用下,早、晚期凋亡率与细胞正常凋亡率相比差异有统计学意义。Western blot检测结果显示,不同浓度雷帕霉素、DAPT作用下,MG63细胞p53表达量随药物浓度升高而增加,而耐雷帕霉素MG63细胞p53表达量未随药物浓度升高而增加。结论雷帕霉素、DAPT对MG63细胞及耐雷帕霉素MG63细胞均能抑制增殖、促进凋亡。二者均可能是通过促进p53蛋白表达而发挥凋亡效应。凋亡过程中阻断mTOR后可能会降低骨肉瘤细胞对DAPT的敏感性,同时抑制Notch通路与p53的协同作用。

• 单位
  广西医科大学第一附属医院