α-芋螺毒素LvIA特定氨基酸的突变对其活性的影响

作者：李浩楠; 毛楷林; 熊洋; 长孙东亭; 朱晓鹏^*; 罗素兰^*

来源：中国海洋药物, 2020, 39(06): 45-51.

DOI：10.13400/j.cnki.cjmd.2020.06.007

• α-芋螺毒素LvIA
• 烟碱型乙酰胆碱受体
• 突变体
• 电生理
• 活性

目的对特异区分α6/α3β2β3和α3β2 2种nAChRs亚型的α-CTx LvIA进行研究,确定影响其活性的关键氨基酸位点。方法通过序列比对,两步法氧化折叠、双电极电压钳和圆二色谱等技术确定Lv IA中影响其活性的关键氨基酸位点,并探索该位点对Lv IA影响的机制。结果确定了Lv IA中第5位组氨酸(His,H)的关键作用,当第5位的His分别被丙氨酸(Ala,A)、天冬氨酸(Asp,D)和色氨酸(Trp,W)分别取代后,都会导致Lv IA对所有受体亚型的活性丧失。圆二色检测结果表明该位点的变化对Lv IA的二级结构没有显著影响。结论第5位His是维持Lv IA活性的关键氨基酸残基,该氨基酸极性和侧链的变化均会导致Lv IA活性的丧失,但是对其二级结构影响较小。Lv IA中第5位氨基酸与nAChR的相互作用力是保证其活性的关键。该结论为基于Lv IA设计新型专一作用于乙酰胆碱受体的工具探针改造提供了重要信息。

• 单位
  海南大学