摘要

枫香是广西重要的乡土树种之一,有着较高的用材、观赏及药用价值,该文基于枫香转录组测序结果进行EST-SSR引物开发,可为枫香群体遗传学研究的开展提供有效、可靠的分子标记工具,对于该树种的保护、开发和利用有着重要的意义。研究基于转录组测序技术,检测枫香SSR位点并设计引物,通过PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选出具有较高多态性的枫香EST-SSR引物,并通过对1个枫香天然群体进行遗传多样性分析验证这些SSR引物实际应用效果。结果表明:(1)基于转录组测序得到的枫香SSR Unigene中共发掘到23 777个SSR位点,单核苷酸重复类型SSR位点占总位点比例最高(46.54%)。重复次数上,5~12次之间的SSR位点占比最高(72.36%)。(2)共开发出262对SSR引物,有效扩增率为53.1%,最终筛选出扩增稳定、条带清晰的引物18对。(3)多态性检测结果表明,所有位点均具有多态性;天然群体遗传多样性结果显示,该天然群体中等位基因数量(Na)、有效等位基因数量(Ne)、Shonnon信息指数(I)、观察杂合度(Ho)变化范围分别为2~4、1.112 8~2.609 6、0.208 9~1.112 7和0.275 9~1.000 0,平均值分别为2.333 3、1.957 4、0.708 5和0.722 6。综上所述,在枫香中占优势的SSR位点重复类型和重复基序与其他物种基本相同;本研究所开发的18对枫香EST-SSR引物可以满足开展枫香群体遗传学研究的需要,为后续枫香种群遗传多样性研究提供了丰富的标记引物。