摘要
目的:研究miR-663b对低糖诱导的人椎间盘退变髓核细胞增殖凋亡的调控机制。方法:运用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测人椎间盘退缩患者组织和葡萄糖(5、1mmoL/L)处理的椎间盘退变髓核细胞中miR-663b的表达;脂质体法将低糖组+miR-NC组(转染miRNC)、低糖组+miR-663b组(转染miR-663b mimics)、低糖组+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、低糖组+anti-miR-663b组(转染anti-miR-663b)转染至1 mmoL/L处理的椎间盘退变髓核细胞。细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞术、免疫印迹(Western blot)检测细胞的吸光度(OD)值、细胞的凋亡率、细胞中细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A (P21)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)的蛋白表达。结果:miR-663b在人椎间盘退缩患者组织和1 mmoL/L葡萄糖(低糖组)处理的椎间盘退变髓核细胞中的表达均明显降低(P<0.05)。低糖组细胞的增殖能力受到抑制,凋亡能力得到提升,并且P21和Caspase-3的蛋白表达量得到提升。过表达miR-663b的低糖组细胞中miR-663b表达明显升高,细胞增殖能力也明显升高,细胞凋亡能力则明显降低,P21和Caspase-3的蛋白表达量得到抑制,而抑制miR-663b的低糖组细胞则发生相反的作用。结论:miR-663b可促进低糖诱导的人椎间盘退变髓核细胞的增殖,抑制凋亡。
-
单位长江航运总医院