摘要
目的 研究微小RNA(miR)-455-3p过表达对宫颈癌C33a细胞放疗敏感性的影响,并探讨相关机制。方法 取对数期宫颈癌C33a细胞,采用脂质体转染法将miR-455-3p mimics、miR-NC转染至C33a细胞,分别设为miR-455-3p mimics组、miR-NC组。取未经处理的细胞设为空白组。荧光显微镜观察转染效率;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot检测miR-455-3p mRNA,去乙酰化酶2(HADC2)mRNA及蛋白相对表达量;生物信息学软件及双荧光素酶实验验证miR-455-3p与HADC2的靶向关系;二甲基噻唑(MTT)法检测不同照射剂量对C33a细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;PI染色检测细胞周期;Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白相对表达量。结果 荧光显微镜观察结果显示,miR-NC组、miR-455-3p mimics组转染效率均>80%;miR-455-3p mimics组miR-455-3p mRNA相对表达量、不同照射剂量对C33a细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、细胞周期G0/G1占比高于空白组、miR-NC组(P<0.05),HADC2 mRNA及蛋白相对表达量、HADC2-WT相对荧光素酶活性值、IC50值、G2/M占比、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT低于空白组、miR-NC组(P<0.05)。结论 miR-455-3p过表达可增强C33a细胞放疗敏感性,推测其作用机制与下调HADC2表达,抑制PI3K/AKT信号通路有关。
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单位南阳医学高等专科学校第一附属医院