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摘要
目的探讨不同的培养条件包括母代细胞的生长状态及细胞密度对U251细胞增殖及凋亡的影响及相关机制。方法细胞增殖实验检测U251细胞在不同的培养条件下(母代细胞的生长状态及细胞密度)的生长情况,Western blot检测p-ERK1/2、cleaved-caspase3、cleaved-caspase8、p27、cyclin D1、p-PLK、p-FPAK的表达。Caspase3活性实验检测细胞凋亡。流式细胞实验检测细胞周期及增殖。结果将平台期U251细胞重新种植高密度即PH组,细胞快速增殖;将指数期U251细胞重新种植高密度即EH组,细胞增殖缓慢并伴随细胞脱壁。EH组细胞表达cleaved-caspase3、cleaved-caspase8,且caspase3活性升高,提示细胞发生凋亡。流式细胞实验显示EH组细胞发生G2阻滞,Western blot显示cyclin D1、p-PLK1表达下调,而p27表达上调。促进FAK的表达并不能抑制细胞凋亡。功能性p27的高表达抑制EH组细胞发生凋亡,并促进细胞增殖。结论母代细胞的生长状态及细胞密度影响U251细胞的增殖及凋亡,功能性p27的表达在维持脑胶质瘤细胞的增殖及存活中起到重要作用。
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