p53表达下调对saRNA介导p21基因激活的影响研究

作者：吴嘉; **; 杨为民; 汪成合; 盖强强; 胡嘏

来源：现代泌尿生殖肿瘤杂志, 2015, 7(06): 350-353.

DOI：10.3870/j.issn.1674-4624.2015.06.009

• siRNA
• saRNA
• RNA干扰
• RNA激活

目的研究抑制p53基因的表达是否影响小双链RNA(dsRNA)分子dsP21-322对p21基因表达的激活效应。方法体外培养人肾癌ACHN细胞(p53野生型)和膀胱癌5637细胞(p53突变型)。采用RT-PCR方法筛选具有抑制p53基因表达的干扰RNA分子dsP53-3。人工合成具有激活效应的dsRNA分子dsP21-322,以及与人体已知RNA序列无同源性的阴性对照小dsRNA分子dsCon。将上述dsRNA分子转染到两种肿瘤细胞中,每种细胞均分为5组,即:1空白组;2阴性对照组;3dsP21-322单转染组;4dsP53单转染组;5dsP21-322与dsP53共转染组。通过荧光染色检测转染效率,采用Real-time PCR和Western-blot技术检测各组细胞中p53和p21转录和翻译水平上的表达差异。结果 1在单转染组中,dsP21-322能够激活ACHN细胞、5637细胞中p21基因表达;2dsP53-3能够抑制ACHN细胞、5637细胞中p53基因表达;3在共转染组中ACHN细胞、5637细胞中p53基因下调,而dsP21-322依然能够激活p21基因表达。结论外源合成的saRNA分子dsP21-322能激活ACHN细胞、5637细胞中p21基因表达,该激活效应不受p53蛋白表达量的影响。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院