VAV2蛋白DH结构域与CDC42蛋白相互作用的亲和力和热力学参数研究

作者：何诗雨; 串俊兰; 杨正林^*

来源：重庆医科大学学报, 2021, 46(12): 1492-1496.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.002829

• VAV2
• CDC42
• 鸟嘌呤核苷酸交换因子
• 蛋白相互作用
• 等温滴定量热法

目的 ：利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域（VAV2-DH）与CDC42的相互作用。方法 ：首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上，构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体。再将重组表达载体转入大肠杆菌中诱导表达蛋白，并亲和层析、凝胶过滤层析纯化得到VAV2-DH和CDC42蛋白，最后利用鸟嘌呤核苷酸交换试验来验证VAV2-DH的鸟苷酸交换活性，并采用等温滴定量热技术检测这2种蛋白质相互作用的亲和力和热力学参数。结果：VAV2-DH和CDC42蛋白的平衡解离常数K_D=(11.44±2.12)μmol/L，其中摩尔结合焓DH=(-224.33±95.48) kJ/mol、-TDS=(195.97±95.95) kJ/mol、吉布斯自由能DG=(-28.30±0.49) kJ/mol。结论：VAV2-DH和CDC42蛋白属于中等强度的相互作用，是一个焓驱动的结合过程。

• 单位
  四川省医学科学院(四川省人民医院); 四川省医学科学院（四川省人民医院）; 西南医科大学; 四川省医学科学院·四川省人民医院