摘要
目的采用神经电生理法评价骨骼肌不同亚型烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)在大鼠脓毒症相关神经肌肉功能障碍中的作用。方法选择SPF级成年雄性SD大鼠,体重200~220g,2~3月龄,采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型。脓毒症建模成功后第3天取右侧坐骨神经-胫前肌12份为脓毒症组(S组),另取正常大鼠坐骨神经-胫前肌12份为对照组(C组)。采用细胞内微电极记录法监测神经肌接头终板电位(EPP)。取6份坐骨神经-胫前肌采用终浓度为1μmol/L的成熟型nAChR(e-nAChR)特异性拮抗剂waglerin-1、终浓度为250 nmol/L的胎儿型nAChR(γ-nAChR)特性拮抗剂αA-OIVA及终浓度为6 nmol/L的神经型nAChR(α7-nAChR)特异性拮抗剂MLA孵育。于孵育15 min时记录EPP幅值,计算EPP幅值的差值(△EPP)和EPP变化率(△EPP%)。另取6份坐骨神经-胫前肌,分别采用终浓度为1μmol/L waglerin-1+250 mol/LαA-OIVA的Kreb混合液、终浓度为1μmol/L waglerin-1+6 nmol/L MLA的Kreb混合液、终浓度为250 nmol/LαA-OIVA+6 nmol/L MLA的Kreb混合液孵育15 min,记录EPP幅值。不同拮抗剂处理之间使用不含拮抗剂的Kreb液洗脱15min。结果与C组比较,S组拮抗ε-nAChR后△EPP和△EPP%降低,拮抗γ-nAChR后△EPP%降低,拮抗α7-nAChR后△EPP和△EPP%升高,拮抗ε-nAChR+γ-nAChR和拮抗ε-nAChR+α7-nAChR后EPP幅值升高,拮抗γ-nAChR+α7-nAChR后EPP幅值降低(P<0. 05)。与拮抗γ-nAChR比较,S组拮抗α7-nAChR后△EPP和△EPP%明显增高(P<0.05)。与拮抗ε-nAChR+γ-nAChR比较,拮抗ε-nAChR+α7-nAChR后EPP幅值降低(P<0.05)。结论骨骼肌终板膜ε-nAChR功能减弱和α7-nAChR功能增强在脓毒症相关神经肌肉功能障碍中占主导作用,且两者的作用相当。
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单位西南医科大学; 合江县人民医院; 南充市高坪区人民医院