PKM2影响鼻咽癌细胞增殖凋亡及机制研究

作者：**平; 孙丽; 郝妮妮; 远洋; 赵立民

来源：中国免疫学杂志, 2018, 34(05): 675-680.

• 鼻咽癌
• PKM2
• 增殖
• 凋亡

目的:探讨PKM2对鼻咽癌细胞增殖凋亡的影响。方法:鼻咽癌细胞CNE-1转染PKM2小干扰RNA(PKM2siRNA1和PKM2 siRNA2)和阴性对照(siRNA control),荧光定量PCR和Western blot检测细胞中PKM2水平,筛选干扰效果好的PKM2 siRNA2继续研究。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,细胞克隆试验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测活性氧(ROS)水平,Western blot检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)、C-myc、β-连环蛋白(β-catenin)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平。结果:细胞转染PKM2 siRNA1和PKM2 siRNA2后PKM2 mRNA和蛋白水平与没有转染的细胞相比均明显下降,并且转染PKM2 siRNA2后细胞中PKM2水平下降更多,而转染siRNA control的细胞中PKM2水平与没有转染的细胞相比没有明显变化。下调PKM2表达后的细胞凋亡率由(9.36±1.04)%升高至(48.42±5.28)%,细胞克隆形成率从(75.48±8.25)%降低至(46.15±3.47)%,细胞OD值从(0.86±0.11)下降至(0.52±0.04),细胞中ROS水平升高,细胞中p-p38MAPK、Cleaved Caspase-3蛋白水平也明显升高,细胞中C-myc、β-catenin水平明显下降。结论:PKM2表达下调抑制鼻咽癌细胞生长,促进鼻咽癌细胞凋亡,作用机制可能与p38MAPK和Wnt/β-catenin信号通路有关。

• 单位
  潍坊医学院附属医院