萱草原生质体制备体系的优化

作者：牛晓茹; 景欢欢; 田宁; 郑硕理; 陈白冰; 黄程前^*; 陈己任

来源：湖南生态科学学报, 2022, 9(04): 60-68.

• 萱草
• 叶片
• 花瓣
• 原生质体
• 山梨醇

【目的】萱草是集药用、食用和观赏价值于一身的重要经济作物。通过原生质体制备条件及其参数的优化，建立高效的萱草原生质体制备体系，为通过体细胞杂交获取的优异种质资源奠定基础。【方法】以萱草品种‘贵妇’叶片和花瓣为材料，分别探讨纤维素酶浓度、离析酶浓度、酶解时间、渗透压调节剂种类及浓度、离心转速等因素对原生质体的产量和活力的影响。【结果】萱草叶片在含有0.5%纤维素酶R-10,0.75%离析酶R-10的酶解液中，酶解6 h酶解效果最好，原生质体产量达4.25×105个/克，活力达82.79%;萱草花瓣在含有1.5%纤维素酶R-10,0.5%离析酶R-10的酶解液中，酶解4 h得到的原生质体产量最高，达4.33×105个/克，活力为82.53%。叶片和花瓣均为使用0.4 mol/L山梨醇作为渗透压调节剂时，原生质体产量最高。【结论】以萱草叶片为材料的原生质体制备最佳方案为：0.5%纤维素酶R-10+0.75%离析酶R-10+0.4 mol/L山梨醇，酶解时间为6 h;以花瓣为材料的原生质体制备最佳方案为：1.5%纤维素酶R-10+0.5%离析酶R-10+0.4 mol/L山梨醇，酶解时间为4 h。在原生质体纯化时，叶片及花瓣最佳离心转速均为800 r/min。

• 单位
  湖南省森林植物园; 湖南农业大学