miR-9-5p通过SIRT1/NF-κB通路促进胰腺癌细胞凋亡的实验研究

作者：李雪颀; 周青宏; 潘春风; 王语阳; 苏拾香; 岑兰英; 潘路娟; 覃月秋^*

来源：右江民族医学院学报, 2023, 45(02): 195-201.

• miR-9-5p
• 沉默调节蛋白1
• 半胱氨酸蛋白酶-3
• NF-κB
• 胰腺肿瘤

目的 探讨miR-9-5p通过调控SIRT1及NF-κB表达对胰腺癌细胞(PANC-1)凋亡相关基因Caspase-3表达的影响。方法 使用miR-9-5p mimic慢病毒转染人胰腺癌PANC-1细胞建立稳转株(mimic组),空载体转染作为阴性对照组(NC组),以未处理的PANC-1细胞作为空白对照组(空白组)。采用qRT-PCR检测PANC-1细胞中miR-9-5p、SIRT1及Caspase-3 mRNA的表达水平；Western Blot检测SIRT1、NF-κB通路相关蛋白及Caspase-3蛋白表达量；ELISA检测细胞裂解液中SIRT1及Caspase-3蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验明确miR-9-5p和SIRT1的靶向关系；Pearson相关分析确定miR-9-5p、SIRT1及Caspase-3 mRNA表达的相互关系。结果 mimic组miR-9-5p mRNA表达较对照组明显升高，结果有统计学意义，提示转染成功。与空白组及NC组相比，mimic组SIRT1 mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.01),p-NF-κB p65与NF-κB p65上调(P<0.01),Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平上调(P<0.01)。双荧光素酶报告基因显示miR-9-5p可抑制野生型SIRT1细胞的荧光活性，miR-9-5p可靶向调控SIRT1的表达；Pearson相关分析发现miR-9-5p和SIRT1的表达水平呈负相关(r=-0.849,P<0.05);miR-9-5p和Caspase-3的表达水平呈正相关(r=0.796,P<0.05)。结论 过表达miR-9-5p可促进PANC-1细胞凋亡相关基因Caspase-3的表达，其机制可能与靶向调控SIRT1继而调节NF-κB通路有关，这将为胰腺癌的诊断及治疗提供新的思路。

• 单位
  右江民族医学院; 右江民族医学院附属医院