钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶的原核表达及纯化

作者：赫慧琛; 姜晓杰; 高金亮; 徐萌杰; 王英; 王文杰; 李炜; 祁美荣

来源：中国生物制品学杂志, 2013, (12): 1764-1767.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.000037

• 钝顶螺旋藻
• 超氧化物歧化酶
• 原核细胞
• 基因表达
• 纯化
• 比活性 Spirulina platensis
• Superoxide dismutase(SOD)
• Prokaryotic cells
• Gene expression
• Purification
• Specific activity

目的原核表达并纯化钝顶螺旋藻超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)。方法利用PCR技术扩增钝顶螺旋藻sod基因,克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-sod,转化大肠埃希菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。表达的重组融合蛋白SOD-GST利用蛋白纯化树脂Glutathione SepharoseTM4 Fast Flow纯化后,采用改进的邻苯三酚自氧化法测定重组SOD的活性。结果重组表达质粒pGEX-4T-sod经双酶切和测序证实构建正确;表达的融合蛋白SOD-GST的相对分子质量约为49 000,表达量占菌体总蛋白的3...

• 单位
  内蒙古科技大学包头医学院; 鄂尔多斯市疾病预防控制中心