摘要
目的研究探讨犬骨髓间充质干细胞的分离、培养方法以及生长增殖特性。方法无菌技术抽取比格犬骨髓,密度梯度离心法获取细胞。加入含胎牛血清体积分数为0.1的低糖DMEM培养基中进行原代培养;待细胞生长至80%~90%融合时,1︰3传代培养。倒置显微镜观察细胞形态。MTT法测定3、5和10代细胞生长曲线。流式细胞仪检测第5代细胞的表面抗原分子。结果原代培养24h后看见微少贴壁细胞,初起为小圆形,3d后可见梭形类成纤维细胞呈漩涡样生长。10代以后细胞逐渐有宽大梭形样变,增殖逐渐减缓,偶有细胞飘零。流式细胞仪检测传5代细胞有96%表达CD44,95%表达CD29,而只有5%表达CD34。生长曲线显示,传3、...
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