乙脑/寨卡嵌合病毒包膜蛋白T120A位点突变对小鼠脑内神经毒力的影响

作者：冯亚岚; 李玥珂; 任阳; 唐丽萍; 黄荣; 袁磊; 杨健^*

来源：微生物学杂志, 2021, 41(01): 69-75.

• 寨卡病毒
• 乙脑病毒
• 嵌合病毒
• 包膜蛋白
• 神经毒力

为探索包膜蛋白T120A突变对乙脑/寨卡嵌合病毒JEV/ZIKV小鼠脑内神经毒力的影响,应用重叠延伸PCR和分子克隆技术构建含T120A突变的乙脑/寨卡嵌合病毒全长cDNA质粒,经酶切、测序鉴定后,以其为模板体外转录制备RNA,电转染导入BHK21细胞,收获培养液上清获得突变病毒株JEV/ZIKV (T120A)。分别用JEV/ZIKV和JEV/ZIKV (T120A)感染BHK21细胞,绘制病毒增殖曲线,比较蚀斑大小;脑内接种昆明鼠,比较病毒小鼠脑内神经毒力差异。突变病毒感染性克隆经酶切鉴定表明成功构建,增殖曲线发现:突变病毒高峰滴度为5.59 log10pfu/mL,低于JEV/ZIKV的峰值(6.8 log10pfu/mL),JEV/ZIKV (T120A)的小鼠脑内神经毒力LD50为1.38 PFU(0.03 mL),JEV/ZIKV病毒LD50为2.21 PFU(0.03 mL)。研究表明寨卡病毒包膜蛋白T120A突变降低了乙脑/寨卡嵌合病毒的复制能力,但却轻微增强了病毒小鼠脑内神经毒力。

• 单位
  川北医学院附属医院; 基础医学院; 川北医学院