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摘要
本研究旨在构建单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)衣壳支架蛋白ICP35的原核表达载体，并分析其在HSV-2增殖中的表达特性。以HSV-2基因组DNA为模板，采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增HSV-2ICP35的编码基因UL26.5，并克隆至原核表达载体pET-32a(+)，转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行诱导表达，将纯化的重组ICP35免疫家兔后获得抗体，采用免疫荧光检测ICP35在HSV-2增殖中的表达特性。结果显示，HSV-2UL26.5基因的PCR产物大小约为1 065bp，原核表达重组蛋白的相对分子质量约为6.3×104，免疫家兔的血清抗体可特异性识别HSV-2ICP35。免疫荧光检测结果显示，HSV-2ICP35可在感染后8h出现于细胞核周围，12h表达量进一步增加并向细胞核内聚集，16h后在细胞核、细胞质内均可检测到聚集成斑点状的衣壳支架蛋白。结果表明，HSV-2ICP35原核表达载体的成功构建及对其在HSV-2增殖中表达特性的分析，将为研究UL26.5基因的功能、蛋白相互作用、病毒与宿主的相互作用及筛选药物靶标等奠定基础。
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