HPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中26种胆汁酸

作者：刘雅楠; 雷凯; 向东; 贺雯茜; 李喜平; 张程亮^*; 刘东^*

来源：药物分析杂志, 2018, 38(10): 1767-1774.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2018.10.15

• 胆汁酸
• 大鼠血浆
• 方法学验证
• 高效液相色谱-质谱联用
• 蛋白沉淀法

目的:建立HPLC-MS/MS法同时定量检测大鼠血浆中26种胆汁酸的浓度。方法:大鼠血浆采用蛋白沉淀法处理,26种胆汁酸使用Symmetry C18色谱柱分离。流动相为水(0.1%甲酸+10 mmol·L-1乙酸铵)-甲醇(0.1%甲酸+10 mmol·L-1乙酸铵),梯度洗脱,流速0.15 mL·min-1,检测时间50 min。检测系统采用电喷雾离子源,负离子模式。结果:26种胆汁酸线性关系良好且色谱峰互不干扰,定量下限为0.010～0.200μmol·L-1,日内、日间回收率均在85.9%～113.8%之间,精密度均在2.0%～13.3%之间,提取回收率在65.7%～104.5%之间。正常SD大鼠血浆中26种胆汁酸浓度范围为0.0192～2.83μmol·L-1,其中猪去氧胆酸(HDCA)、去氧胆酸(DCA)、胆酸(CA)、甘氨胆酸(GCA)、β-鼠胆酸(β-MCA)和甘氨脱氧胆酸(GDCA)是SD大鼠血浆中的主要胆汁酸。结论:该方法准确有效,灵敏度高,操作简单,可在50 min内同时检测大鼠血浆中26种胆汁酸,并可为其他生物基质中的胆汁酸检测方法提供参考。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院