Pim1调控巨噬细胞M1型极化介导血管内皮细胞炎症在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化中的作用

作者：钟耕瑞; 付萌萌; 王小波; 王汉琴^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(12): 2113-2121.

• Pim1蛋白
• M1型巨噬细胞
• 炎症
• 动脉粥样硬化

目的：探讨Pim1在巨噬细胞M1型极化中的作用及M1型巨噬细胞对内皮细胞黏附分子表达的影响，并观察其在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)形成中的作用。方法：采用脂多糖(LPS)刺激小鼠Raw264.7细胞建立M1型巨噬细胞模型，用Pim1特异性抑制剂SMI-4a和转染Pim1小干扰RNA(siPim1)进行干预，分为对照组、LPS组、LPS+SMI-4a组、LPS+siNC组和LPS+siPim1组。收集以上各组Raw264.7细胞上清作为条件培养液(CM)孵育原代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，分为CMM0、CMM1、CMSMI-4a、CMsiNC和CMsiPim1组。动物采用颈动脉部分结扎术建立颈动脉AS模型，用6周龄ApoE-/-雄性小鼠18只建模后，随机分为模型组及SMI-4a干预组，每组各9只。采用油红O染色法观察颈动脉脂质蓄积变化。免疫荧光法和Western blot法检测M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Pim1、血管内皮标志物血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、细胞间黏附分子1(ICAM1)和血管细胞黏附分子1(VCAM1)在血管壁和细胞中的表达变化。结果：与对照组相比，LPS显著上调了Raw264.7细胞M1型极化标志物iNOS蛋白表达(P<0.01)，同时Pim1蛋白表达也显著增高(P<0.05);SMI-4a干预和siPim1转染Raw264.7细胞，显著抑制LPS诱导的Pim1和iNOS表达(P<0.05或P<0.01)。与CMM0相比，CMM1显著上调HUVEC中ICAM1和VCAM1蛋白表达(P<0.05或P<0.01);CMSMI-4a和CMsiPim1均显著抑制了HUVECs中ICAM1和VCAM1表达(P<0.01)。动物实验水平，建模后结扎侧左颈动脉可见脂质沉积，有AS斑块形成，血管壁iNOS表达显著增多(P<0.01),Pim1、ICAM1和VCAM1蛋白表达上调(P<0.05)。SMI-4a干预后，与模型组相比，左颈动脉脂质沉积被抑制，Pim1和iNOS表达显著降低(P<0.05或P<0.01)，血管内皮标志物VE-cadherin蛋白水平升高(P<0.05)，同时ICAM1和VCAM1蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论：抑制Pim1可以抑制ApoE-/-小鼠AS斑块形成，其机制可能与减少巨噬细胞M1型极化，降低内皮细胞炎症反应有关。

• 单位
  解剖学教研室; 基础医学院; 湖北医药学院