摘要
目的 研究苯并[a]芘(BaP)、高温及其联合作用对大鼠小脑粒细胞存活率及热应激蛋白70与热应激蛋白90 β(HSP70、HSP90 β)表达水平的影响。方法 取8日龄SD大鼠小脑粒细胞原代培养,将其分为空白对照组、溶剂对照组(等量DMSO平行处理)、低浓度BaP染毒组(BaP 5 μmol/L + S9 mix)、高浓度BaP染毒组(BaP 5 0 μmol/L +S9 mix)、高温处理组(4 0℃,45min预热)、高温处理+低浓度BaP染毒组、高温处理+高浓度BaP染毒组。染毒90min ,胰酶消化法收集标本,台盼蓝染色法检测存活率,用同一样本进行Westernblot法检测HSP70、HSP90 β相对表达值。结果 高浓度BaP染毒、高温处理、高温处理+低浓度BaP染毒、高温处理+高浓度BaP染毒组均可降低细胞存活率(P <0 . 0 5~P <0 . 0 0 0 0 1) ,HSP90 β相对表达值升高。HSP90 β相对表达值与细胞存活率间有线性相关关系(r=-0 . 7962 ,P <0 0 5 ) ,而HSP70相对表达值与细胞存活率间无线性相关关系(r =0 . 2 174,P >0 . 0 5 )。结论 高浓度BaP染毒或BaP与高温联合作用对体外培养神经元具有一定的损害作用。HSP90 β相对表达值可用作体外培养神经元损害程度的标志。
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单位重庆医科大学; 华中科技大学同济医学院