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摘要
目的 观察程氏蠲痹汤(JBT)对TNF-α诱导的滑膜成纤维细胞(FLS)焦亡的抑制作用及其分子机制。方法 以FLS为研究对象，按CCK8实验结果将其分为A:FLS组;B:TNF-α+FLS组;C:TNF-α+FLS+JBT组(最佳程氏蠲痹汤剂量)。电镜观察细胞形态,使用乳酸脱氢酶(LDH)释放测定各组质膜孔隙形成的情况，采用RT-qPCR、Western Blot(WB)实验观察各组细胞中细胞标志基因、蛋白的表达，CO-IP检测NLRP3和Caspase-1相互作用。结果 CCK8实验结果发现JBT冻干粉浓度在0.5 mg/mL，培养48 h效果最佳。透射电镜显示总体病变程度B组<C组0.05)。RT-qPCR及WB结果显示，A组和C组、B组相比,NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β mRNA及蛋白表达上调(P<0.01)与B组相比，C组的NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1βmRNA及蛋白的表达下调(P<0.01)。根据灰度值的读取结果IP组模型与药物的差异程度与Input组内模型与药物的差异程度存在差异性表明JBT可在一定程度上影响NLRP3和Caspase-1的结合。结论 程氏蠲痹汤通过下调NLRP3/Caspase-1细胞焦亡信号通路而抑制TNF-α诱导的滑膜成纤维细胞焦亡。
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